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江蘇蘇州智淼消防主營(yíng)：全套消防檢測(cè)設(shè)備、電氣檢測(cè)設(shè)備、甲乙級(jí)防雷檢測(cè)工具、火災(zāi)現(xiàn)場(chǎng)勘查箱、消防監(jiān)督檢查箱、二合一消防煙槍、試水/細(xì)水霧裝置、消防安全評(píng)估設(shè)備配備；提供代送檢服務(wù)。

淺淡檢查儀器及應(yīng)用

作者：江蘇消防檢測(cè)設(shè)備來(lái)源：http://www.zgyzsfw.com/發(fā)布時(shí)間：2020-08-20 16:03:34

一個(gè)實(shí)驗(yàn)室測(cè)定結(jié)果的可靠性是由其精密度、準(zhǔn)確性及可比性所決定的，一般必需從下面幾方面著手。

一．選好測(cè)定方法；

二．購(gòu)買質(zhì)量過(guò)硬的試劑盒；

三．要有質(zhì)優(yōu)的測(cè)試儀器；

四．必需進(jìn)行正確的校準(zhǔn)；

五．還要規(guī)范化操作；

六．搞好過(guò)硬的室內(nèi)質(zhì)量控制；

七．積極參加室間質(zhì)評(píng)活動(dòng)；

八．還要有一支素質(zhì)高的隊(duì)伍。

現(xiàn)就生化分析儀檢查儀器的校準(zhǔn)問(wèn)題提出個(gè)人看法。

一、校準(zhǔn)的重要性和必要性

首先必須明確生化分析儀不論如何先進(jìn)，它還是一個(gè)比較器，它測(cè)試出來(lái)的標(biāo)本結(jié)果是隨著標(biāo)準(zhǔn)限的設(shè)置不同而變化的。所以，在衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心擬定的“臨床實(shí)驗(yàn)室（定量測(cè)定）室內(nèi)質(zhì)控工作指南”中明確指出“對(duì)測(cè)定標(biāo)本的儀器一定要求進(jìn)行校準(zhǔn)，校準(zhǔn)時(shí)要選擇合適的（配套的）標(biāo)準(zhǔn)品/校準(zhǔn)品；如有可能，校準(zhǔn)品應(yīng)能溯源到參考方法或/和參考物質(zhì)；對(duì)不同的分析項(xiàng)目要根據(jù)其特性確立各自的校準(zhǔn)頻率。”這說(shuō)明校準(zhǔn)儀器是室內(nèi)質(zhì)控的重要部分，強(qiáng)調(diào)了校準(zhǔn)工作的必要性和重要性，同時(shí)指出了校準(zhǔn)的方法和要求。

二、確立測(cè)定系統(tǒng)的概念

對(duì)于一個(gè)臨床檢測(cè)項(xiàng)目，如果所用方法的測(cè)定原理、試劑、儀器、校準(zhǔn)品中任何一個(gè)不同，都可能得到不同的測(cè)定結(jié)果。因此，測(cè)定系統(tǒng)包括測(cè)定原理、試劑、儀器、校準(zhǔn)品四要素。如果我們想要得到準(zhǔn)確可靠的測(cè)定結(jié)果，而該結(jié)果又具有與國(guó)際、國(guó)內(nèi)其他實(shí)驗(yàn)室的可比性，應(yīng)該自己建立一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)測(cè)定系統(tǒng)。在全自動(dòng)生化分析儀上使用配套的試劑和標(biāo)準(zhǔn)品，即日立7170使用寶靈曼的試劑和校準(zhǔn)品（c.f.a.s），在貝克曼CX-7生化分析儀上使用貝克曼的試劑和校準(zhǔn)品等。各儀器廠家均有自己的標(biāo)準(zhǔn)測(cè)定系統(tǒng)。對(duì)于校準(zhǔn)品不能亂用，如絕對(duì)不能用貝克曼的校準(zhǔn)品校準(zhǔn)日立生化儀，同樣也不能用寶靈曼的校準(zhǔn)品去校準(zhǔn)貝克曼生化儀。

三、校準(zhǔn)品和質(zhì)控品

校準(zhǔn)品（Calibration materials）含有已知量的欲測(cè)物，用以校準(zhǔn)該測(cè)定方法的數(shù)值，它與該方法及試劑、儀器是相關(guān)聯(lián)的。校準(zhǔn)品的作用是為了減少或消除儀器、試劑等造成的系統(tǒng)誤差。因此最好為人血清基質(zhì)，以減少基質(zhì)效應(yīng)造成的誤差。

質(zhì)控品（Control materials）只用于和待測(cè)標(biāo)本同時(shí)測(cè)定的，為了控制標(biāo)本的測(cè)定誤差，因此要求保存時(shí)間十分穩(wěn)定。前者是校準(zhǔn)其值而后者是控制誤差用的。

四、校準(zhǔn)前準(zhǔn)備

1 .了解燈泡已使用多久？檢查飄移是否合乎要求；

2．檢查比色杯的清潔及磨損情況？必要時(shí)進(jìn)行更換；

3．用清潔劑泡洗管道

4．測(cè)定儀器的精密度及線性是否達(dá)到儀器性能要求？

五、定值質(zhì)控血清是否可以校準(zhǔn)檢查儀器？

我們?cè)谙嗤瑮l件下，同時(shí)用五個(gè)進(jìn)口產(chǎn)品，每家兩種不同濃度的定值如TP、ALB、UREA、UA、ALP、GGT、CK、HBDH、LD、AMY等，在日立7170A上進(jìn)行測(cè)定(用常規(guī)試劑)，詳見質(zhì)控血清對(duì)部份常規(guī)測(cè)定項(xiàng)目（如T、ALB、UREA、Cr、UA、K、Na、Cl、AST、ALT）結(jié)果與靶值比較：

表不同廠家定值質(zhì)控對(duì)TP、ALB、、AST、ALP結(jié)果與靶值

* 從總蛋白結(jié)果來(lái)看RANBOX與Bio-Red 相差為6.45%，而寶靈曼與Bio-Red 較為接近；

* 從白蛋白結(jié)果分析，寶靈曼與Bio-Red相對(duì)相差5.75%，與總蛋白結(jié)果明顯不同。Bio-Red則與汽巴康寧比較接近。

* UREA結(jié)果中凡是高值均上不去，分析其原因很可能與我們采用試劑盒的質(zhì)量有關(guān)，所以試劑盒的線性范圍理應(yīng)成為選擇試劑盒的重要依據(jù)之一。但從低值結(jié)果分析，也有5%的偏差（Bio-Red與Human）

* AST與ALT測(cè)定值均低于靶值，這就涉及我們選用什么K值問(wèn)題。

* ALP測(cè)定中RANDOX（-16.6%）與寶靈曼（2.7%）靶值之間竟相差19.3%，這可能涉及試劑盒選用緩沖液種類，PH值以及所用ε值等有關(guān)。

通過(guò)上述結(jié)果比較，說(shuō)明不同廠家生產(chǎn)的定值質(zhì)控血清靶值之間有的相差較大，提示我們決不能用定值質(zhì)控血清代替校準(zhǔn)品作校準(zhǔn)用。

六、校準(zhǔn)方法

例如日立(Hitachi)系列您必須購(gòu)買寶靈曼(Boehringer)的試劑及其校準(zhǔn)的說(shuō)明書設(shè)置參數(shù)，用c.f.a.s.校準(zhǔn)血清進(jìn)行校準(zhǔn)，即可獲得各項(xiàng)目的校準(zhǔn)K值，同時(shí)觀察一下各項(xiàng)目測(cè)定時(shí)反應(yīng)進(jìn)程圖，檢查各項(xiàng)目參數(shù)設(shè)置是否在最佳位置，如不在最佳位置應(yīng)予以重新設(shè)置并測(cè)定。此時(shí)得到的K值即為準(zhǔn)確的校準(zhǔn)K值，然后測(cè)定待測(cè)的10至20份新鮮血清三次取其平均值，應(yīng)該說(shuō)此結(jié)果是用Hitachi-Boehringer檢測(cè)系統(tǒng)所獲的測(cè)定值。然后用此血清值校準(zhǔn)其它測(cè)定系統(tǒng)。

表日立7170、BM試劑連續(xù)四個(gè)月每天進(jìn)行校正(n=81)K值的變化

七、關(guān)于酶活性測(cè)定校準(zhǔn)問(wèn)題

有的主張不進(jìn)行校準(zhǔn)而采用固定K值，有的作者以為應(yīng)該進(jìn)行校準(zhǔn)。酶活力計(jì)算公式如下：

酶活力（u/l）=△A/min×V×106/(ε×v×1)

令k=V×106/（ε×v）

則酶活力（u/l）=△A/min×k

常用K值有以下幾種：

a) 理論K值：根據(jù)理論摩爾消光系數(shù)（ε）來(lái)計(jì)算，如NADH為6.22×103

b) 實(shí)測(cè)K值：由于儀器波長(zhǎng)的精密及半寬度不同，而應(yīng)根據(jù)實(shí)測(cè)ε值來(lái)設(shè)定K值

c) 廠家給的K值：廠家生產(chǎn)試劑盒說(shuō)明書上提供的K值（有的廠家提供6.3×103）

d) 校準(zhǔn)K值：通過(guò)校準(zhǔn)物直接校準(zhǔn)得到的K值

在日立7170A全自動(dòng)生化分析儀上，可以得到幾種不同的酶K值，見下表

表日立7170A全自動(dòng)生化分析儀上用不同方法得到幾種酶的K值

注：1校準(zhǔn)物為寶靈曼c(diǎn).f.a.s，試劑也用寶靈曼的配套試劑。

2括號(hào)內(nèi)數(shù)字是該K值與理論K值相比的變化率

以上摘自張克堅(jiān)文章中

* 從上述K值中不難發(fā)現(xiàn)實(shí)測(cè)K值大于理論K值，這說(shuō)明生化分析儀的測(cè)光系統(tǒng)還存在著一定誤差，如波長(zhǎng)、半寬度及光徑等偏差，使儀器達(dá)不到理論上的最佳狀態(tài)；

* 校準(zhǔn)K值與實(shí)測(cè)K值之間也存在一定的差距，即使指示物和儀器相同，其差異可能由試劑及校準(zhǔn)品造成的；

* 作者認(rèn)為最好使用校準(zhǔn)K值，但必須由兩個(gè)先決條件：1必須使用配套的試劑；2必須使用配套的高質(zhì)量的校準(zhǔn)品，但校準(zhǔn)K值應(yīng)有其溯源性。

關(guān)于酶活標(biāo)準(zhǔn)品，歐洲標(biāo)準(zhǔn)局（BCR）和美國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)研究院（NIST）均發(fā)表了人血清基質(zhì)的酶活性標(biāo)準(zhǔn)物，相信不久將會(huì)有公認(rèn)的標(biāo)準(zhǔn)（校準(zhǔn)）品問(wèn)世。

八、必須擬訂校準(zhǔn)計(jì)劃（文件）

校準(zhǔn)工作不是僅進(jìn)行一次就可萬(wàn)事無(wú)憂一勞永逸，而必須經(jīng)常化。按照“臨床實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制（QC）的要求（草案）”必須要求擬定校準(zhǔn)計(jì)劃，其內(nèi)容包括：

1．建立校準(zhǔn)方法

⑴選擇合適（配套）的校準(zhǔn)品，包括校準(zhǔn)品數(shù)目、類型和濃度；

⑵如有可能校準(zhǔn)品應(yīng)溯源到參考方法或參考物質(zhì)；

⑶確定校準(zhǔn)的頻度。至少每六個(gè)月進(jìn)行一次校準(zhǔn)；

⑷如有下列情況發(fā)生時(shí)，必須進(jìn)行校準(zhǔn)

* 改變?cè)噭┑姆N類，或者批號(hào)更換了。如果實(shí)驗(yàn)室能說(shuō)明改變?cè)噭┡?hào)并不影響結(jié)果的范圍，則可以不進(jìn)行校準(zhǔn)；

* 儀器或者檢驗(yàn)系統(tǒng)進(jìn)行一次大的預(yù)防性維護(hù)或者更換了重要部件，這些都有可能影響檢驗(yàn)性能；

* 質(zhì)控反映出異常的趨勢(shì)或偏移，或者超出了實(shí)驗(yàn)室規(guī)定的接受限，采取一般性糾正措施后，不能識(shí)別和糾正問(wèn)題時(shí)；

2．每個(gè)實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)儀器必需要有校準(zhǔn)計(jì)劃。每次校準(zhǔn)必須有詳情的記錄和分析。每次校準(zhǔn)記錄必須保存?zhèn)洳椤?/span>

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